RESUMEN Introducción. Paraguay es un país endémico para el dengue y la intervención primaria para esta arbovirosis es el control químico de su vector Aedes aegypti, siendo necesario estudiar su resistencia frente a insecticidas utilizados para el control y conocer su sostenibilidad en espacio y tiempo. Objetivo. Determinar la susceptibilidad de poblaciones silvestres de Ae. aegypti procedentes de Villa Elisa-Central, frente al adulticida deltametrina y conocer el área potencial de distribución de estas poblacionesresistentes/susceptibles. Metodología. Se utilizaron mosquitos Ae. aegypti adultos de la Filial 1 obtenidos de ovitrampas colocadas en viviendas geo-localizadas entre diciembre 2017-marzo 2018. Las hembras resultantes de la cría en condiciones ad hoc en laboratorio fueron expuestas a concentraciones crecientes del insecticida. La distribución real de las poblaciones de mosquitos y su área de influencia, fueron modeladas mediante DIVA-GIS. Resultados. La mortalidad promedio observada para cada dosis de deltametrina fue: 5,3% para (0,03%); 47,4% para (0,15%) y 61,2% para (0,3). Se observó áreas de influencia para la presencia de Ae. aegypti. Conclusión. los valores correspondientes a la mortalidad resultaron inferiores al 98%, lo cual fue indicativo de resistencia a dosis diagnóstica. El modelo de distribución geográfica de la población evaluada demostró la existencia de áreas idóneas con condiciones bioclimáticas óptimas (niveles de precipitación, temperatura y humedad), propicias para la aparición de reservorios de agua y presencia del vector, tanto en Villa Elisa, como en los distritos localizados en la periferia tales como San Lorenzo, Lambaré, Ñemby, San Antonio y Fernando de la Mora.

ABSTRACT Introduction. Paraguay is an endemic country for dengue and the primary intervention for this arbovirus is the chemical control of its vector Aedes aegypti, being necessary to study its resistance against insecticides used for control and to know its sustainability in space and time. Objective. To determine the susceptibility of wild populations of Ae. aegypti from Villa Elisa-Central, against the adulticide deltamethrin and to know the potential area of distribution of these resistant/susceptible populations. Methodology. Mosquitoes Ae. aegypti adults from Filial 1 obtained from ovitraps placed in geo-located dwellings between December 2017 and March 2018. The females resulting from rearing under ad hoc conditions in the laboratory were exposed to increasing concentrations of the insecticide. The actual distribution of mosquito populations and their area of influence were modeled using DIVA-GIS. Results. The average mortality observed for each dose of deltamethrin was: 5.3% for (0.03%); 47.4% for (0.15%) and 61.2% for (0.3). Areas of influence were observed for the presence of Ae. aegypti. Conclusion. The values corresponding to mortality were lower than 98%, which was indicative of resistance to diagnostic dose. The geographic distribution model of the evaluated population demonstrated the existence of suitable areas with optimal bioclimatic conditions (levels of precipitation, temperature and humidity), conducive to the appearance of water reservoirs and the presence of the vector, both in Villa Elisa and in the districts located on the outskirts such as San Lorenzo, Lambaré, Ñemby, San Antonio and Fernando de la Mora.

RESUMEN Objetivos: Conocer la diversidad genética de Aedes aegypti en el corredor vial transfronterizo Central-Alto Paraná de Paraguay, con registros de casos de dengue. Materiales y métodos: Se seleccionaron veinte hembras adultas de la eclosión de huevos de Ae. aegypti procedentes de casas geolocalizadas en los departamentos de Alto Paraná, Caaguazú, Cordillera y Central, entre el 2018 y 2019. Se extrajo ADN del tejido de las hembras para amplificación aleatoria de sus patrones polimórficos mediante amplificación aleatoria del ADN polimórfico por PCR (RAPD-PCR), usando cebadores H3 y B03 a fin de conocer parámetros genéticos de diversidad poblacional. Las relaciones entre las poblaciones de mosquitos según la localidad fueron visualizadas mediante análisis no apareado de la media aritmética. Las áreas idóneas de distribución geográfica real y potencial de estas poblaciones de Ae. aegypti fueron analizadas mediante DIVA-GIS 7.3.0 y MAXENT. Resultados: Se identificaron 40 loci mediante perfiles RAPD-PCR, con diferenciación génica moderada (Gst = 0,12). El corredor transfronterizo presentó condiciones bioclimáticas para la presencia de poblaciones variantes de Ae. aegypti, siendo determinantes en la distribución la precipitación del trimestre más cálido y la temperatura media del trimestre más seco. Conclusiones: Se evidencia que existe diversidad genética moderada en las poblaciones de Ae. aegypti procedentes de zonas con registros de casos de dengue ubicadas en el corredor vial transfronterizo que une los departamentos Central y Alto Paraná de Paraguay. El estudio de variabilidad genética de Ae. aegypti es de gran utilidad para la vigilancia entomoepidemiológica y evaluación de posibles eventos de resistencia al control químico.

ABSTRACT Objective: To determine the genetic diversity of Aedes aegypti in the Central-Alto Paraná cross-border road corridor of Paraguay, an area that has reports of dengue cases. Materials and methods: Twenty adult females were selected from hatching Ae. aegypti eggs from households geolocated in the departments of Alto Paraná, Caaguazú, Cordillera and Central, between 2018 and 2019. DNA was extracted from the tissue of females for amplifying their polymorphic patterns by random amplification of polymorphic DNA by PCR (RAPD-PCR), using primers H3 and B03 in order to identify genetic parameters of population diversity. The relationships between mosquito populations according to locality were observed by unpaired arithmetic mean analysis. We used DIVA-GIS 7.3.0 and MAXENT to analyze the suitable areas of actual and potential geographic distribution of these Ae. aegypti populations. Results: Forty loci were identified by RAPD-PCR profiling, with moderate gene differentiation (Gst = 0.12). The cross-border corridor presented bioclimatic conditions for the presence of variant populations of Ae. aegypti, with precipitation in the warmest quarter and mean temperature in the driest quarter being determinant in the distribution. Conclusions: There is evidence of moderate genetic diversity in Ae. aegypti populations from areas that have reported dengue cases in the cross-border road corridor linking the Central and Alto Paraná departments of Paraguay. The study of genetic variability of Ae. aegypti is very useful for entomo-epidemiological surveillance and evaluation of possible resistance to chemical control.

RESUMEN La coinfección por leishmaniasis visceral y VIH es una preocupación mundial debido al ascenso progresivo en los últimos años, en varias regiones del mundo. La progresión de ambas enfermedades conducen al deterioro del sistema inmune, y como resultado, al fracaso terapéutico. El presunto estudio tiene como objetivo describir las características clínico-epidemiológicas de pacientes coinfectados con el virus de inmunodeficiencia humana y leishmaniasis visceral que acuden al Instituto de Medicina Tropical, en el periodo del 2016 al 2020. Es un estudio observacional, descriptivo, de corte transversal, utilizando registros médicos de pacientes con el diagnóstico de leishmaniasis visceral y VIH. Se incluyeron 51 pacientes coinfectados, entre 19 y 65 años, 42 del sexo masculino (82,3 %); 37 procedentes del área Central. Los hallazgos clínicos mas frecuentes fueron el decaimiento del estado general y la fiebre. La mayoría de los pacientes tuvieron un recuento bajo de linfocitos tCD4 y valores elevados de carga viral de VIH. Nuestro trabajo contribuye a conocer el perfil epidemiológico de pacientes coinfectados para mejorar el diagnóstico temprano y consecuentemente el tratamiento médico precoz.

ABSTRACT Co-infection by visceral leishmaniasis and HIV is a global concern due to the progressive rise in recent years, in various regions of the world. The progression of both diseases leads to the deterioration of the immune system, and as a result, to therapeutic failure. The presumed study aims to describe the clinical-epidemiological characteristics of patients co-infected with the human immunodeficiency virus and visceral leishmaniasis who attend the Institute of Tropical Medicine, in the period from 2016 to 2020. It is an observational, descriptive, cross-sectional study, using medical records of patients diagnosed with visceral leishmaniasis and HIV. 51 coinfected patients were included, between 19 and 65 years old, 42 male (82.3%); 37 from the Central area. The most frequent clinical findings were a weakness and fever. Most of the patients had a low tCD4 lymphocyte count and high HIV viral load values. Our study contributes to knowing the epidemiological profile of coinfected patients to improve early diagnosis and consequently early medical treatment.

ABSTRACT Objective: To determine the genetic diversity of Aedes aegypti in the Central-Alto Paraná cross-border road corridor of Paraguay, an area that has reports of dengue cases. Materials and methods: Twenty adult females were selected from hatching Ae. aegypti eggs from households geolocated in the departments of Alto Paraná, Caaguazú, Cordillera and Central, between 2018 and 2019. DNA was extracted from the tissue of females for amplifying their polymorphic patterns by random amplification of polymorphic DNA by PCR (RAPD-PCR), using primers H3 and B03 in order to identify genetic parameters of population diversity. The relationships between mosquito populations according to locality were observed by unpaired arithmetic mean analysis. We used DIVA-GIS 7.3.0 and MAXENT to analyze the suitable areas of actual and potential geographic distribution of these Ae. aegypti populations. Results: Forty loci were identified by RAPD-PCR profiling, with moderate gene differentiation (Gst = 0.12). The cross-border corridor presented bioclimatic conditions for the presence of variant populations of Ae. aegypti, with precipitation in the warmest quarter and mean temperature in the driest quarter being determinant in the distribution. Conclusions: There is evidence of moderate genetic diversity in Ae. aegypti populations from areas that have reported dengue cases in the cross-border road corridor linking the Central and Alto Paraná departments of Paraguay. The study of genetic variability of Ae. aegypti is very useful for entomo-epidemiological surveillance and evaluation of possible resistance to chemical control.

RESUMEN Objetivos: Conocer la diversidad genética de Aedes aegypti en el corredor vial transfronterizo Central-Alto Paraná de Paraguay, con registros de casos de dengue. Materiales y métodos: Se seleccionaron veinte hembras adultas de la eclosión de huevos de Ae. aegypti procedentes de casas geolocalizadas en los departamentos de Alto Paraná, Caaguazú, Cordillera y Central, entre el 2018 y 2019. Se extrajo ADN del tejido de las hembras para amplificación aleatoria de sus patrones polimórficos mediante amplificación aleatoria del ADN polimórfico por PCR (RAPD-PCR), usando cebadores H3 y B03 a fin de conocer parámetros genéticos de diversidad poblacional. Las relaciones entre las poblaciones de mosquitos según la localidad fueron visualizadas mediante análisis no apareado de la media aritmética. Las áreas idóneas de distribución geográfica real y potencial de estas poblaciones de Ae. aegypti fueron analizadas mediante DIVA-GIS 7.3.0 y MAXENT. Resultados: Se identificaron 40 loci mediante perfiles RAPD-PCR, con diferenciación génica moderada (Gst = 0,12). El corredor transfronterizo presentó condiciones bioclimáticas para la presencia de poblaciones variantes de Ae. aegypti, siendo determinantes en la distribución la precipitación del trimestre más cálido y la temperatura media del trimestre más seco. Conclusiones: Se evidencia que existe diversidad genética moderada en las poblaciones de Ae. aegypti procedentes de zonas con registros de casos de dengue ubicadas en el corredor vial transfronterizo que une los departamentos Central y Alto Paraná de Paraguay. El estudio de variabilidad genética de Ae. aegypti es de gran utilidad para la vigilancia entomoepidemiológica y evaluación de posibles eventos de resistencia al control químico.

RESUMEN Objetivo Describir las características clínico-epidemiológicas asociadas a la transmisión de leishmaniosis visceral canina en un área endémica del departamento de Caaguazú, Paraguay. Materiales y Métodos El estudio fue descriptivo observacional, de corte transversal. Se evaluaron 324 caninos seleccionados de 110 viviendas. Se realizó el examen clínico; se obtuvo aspirado de ganglio para el examen directo y muestra de sangre para la posterior detección de anticuerpos anti-Leishmania revelados en tiras inmunocromatográfias. Resultados El 4,9% de la población canina dio positivo con antígeno recombinante rK39. Por la técnica de tinción con Giemsa, se obtuvo 4,3% de canes positivos, de los cuales 37,5% presentaron signos clínicos evidentes. Los signos más frecuentes encontrados en los perros infectados fueron adelgazamiento, onicogrifosis y alopecia (25%). La seroprevalencia fue mayor en perros entre 2 y 4 años de raza mestiza. Conclusiones Los signos clínicos presentes confirmaron la infección parasitaria y el hallazgo indica el rol de los caninos en la epidemiologia de la leishmaniosis en Caaguazú, así como el riesgo que representan para la transmisión. Los resultados obtenidos podrían ayudar a formular un sistema de monitoreo y contribuir con la vigilancia de la leishmaniosis canina en la zona.

ABSTRACT Objective To describe the clinical-epidemiological characteristics associated with the transmission of visceral leishmaniasis in dogs in an endemic area from Caaguazú department, Paraguay. Materials and Methods Cross-sectional study that included 324 dogs from 110 houses. Clinical examination was performed; ganglion aspirate was obtained for direct exa-mination and blood sample for further detection of anti-Leishmania antibodies by rk39 recombinant antigen immunochromatographic strips. Results 4.9% of the canine population resulted positive for rk39 recombinant antigen. By the Giemsa staining technique, 4.3% of positive dogs were obtained, of which 37.5% presented evident clinical signs. The most frequent signs found in infected dogs were thinning, onychogryphosis and alopecia (25%). Seroprevalence was higher in mixed breed dogs between 2 and 4 years old. Conclusion The clinical signs confirmed the parasitic infection, and the finding indicates the role of canines in the epidemiology of leishmaniasis in Caaguazú as well as the risk that they represent for transmission. These results may help to formulate a monitoring system and contribute to the surveillance of canine leishmaniasis in the zone.

ABSTRACT Leishmaniasis is a disease caused by protozoan parasites of the genus Leishmania. These parasites infect to mammalian hosts, including canines that have been implicated as reservoirs of the parasite. The aim of this research was to standardize the technique of PCR-RFLP after amplification of the ITS1 region of Leishmania (Leishmania) infantum, as a useful tool for detection and molecular characterization. Promastigotes from culture and biopsies from dogs with visceral Leishmaniasis previously diagnosed by the Centro Antirrábico Nacional. The ITS1 region of the genomic DNA of Leishmania sp. was amplified using LITSR and L5,8S primers. The technique ITS1 PCR-RFLP applied, allowed the detection of Leishmania (L.) infantum in 10/10 of the isolates from parasites maintained in NNN culture medium, in 10/18 samples from spleen and 10/18 samples from popliteal lymph node. Optimal reaction conditions were 0.2 mM dNTPs, 0.1 pmol of each primer and 1U of Taq polymerase. The sensitivity of PCR was 3 ng/µL in isolates of parasites from NNN culture medium and 60 ng/µL in biopsy samples while the specificity was 100% for the detection of DNA of Leishmania sp. The restriction enzyme Hae III determined fragments of 184, 72 and 55 bp., which were specific to Leishmania (L.) infantum. The marker used is reliable for the detection and characterization of Leishmania sp. in dogs from endemic areas, which could be useful to verify the species of parasites circulating among animals.

RESUMEN La leishmaniasis es una enfermedad producida por protozoarios parásitos del género Leishmania. Estos parásitos infectan a hospedadores mamíferos, entre los cuales los perros han sido implicados como reservorios del parásito. Este trabajo planteó estandarizar la técnica de la PCR-RFLP luego de la amplificación de la región ITS1 de Leishmania spp, como herramienta útil para la detección y caracterización molecular. Se utilizaron promastigotes de cultivo y muestras de biopsias procedentes de perros con leishmaniasis visceral previamente diagnosticados en el Centro Antirrábico Nacional. La región ITS1 del ADN genómico nuclear de Leishmania spp. fue amplificada utilizando los cebadores LITSR y L5,8S. La técnica ITS1 PCR-RFLP aplicada, permitió la detección de Leishmania (L) infantum en 10/10 aislados de parásitos mantenidos en medio NNN, en 10/18 muestras de bazo y 10/18 muestras de ganglio linfático poplíteo. Las condiciones óptimas de reacción fueron 0,2 mM de dNTPs, 0,1 pmol de cada cebador y 1U de Taq polimerasa. La sensibilidad de la PCR fue de 3 ng/µL de ADN en aislados de cultivo NNN y 60 ng/µL de ADN en muestras de biopsias, mientras que la especificidad fue de 100% para la detección de Leishmania sp. La enzima de restricción Hae III, determinó fragmentos de 184, 72 y 55 pb., que resultaron específicos para la especie Leishmania (L.) infantum. El marcador utilizado resultó confiable para la detección y caracterización de Leishmania sp. en perros procedentes de zonas endémicas, lo cual podría ser útil para verificar las especies de parásitos circulantes entre los perros.

Con el fin de entender la dinámica poblacional de Triatoma maculata, se analizó el polimorfismo genético y los índices de infección con Trypanosoma cruzi, utilizando triatominos provenientes de ecotopos y regiones geográficas diferentes. El índice de infección parasitaria para T. maculata, fue de 29.8% a través de la observación directa al microscopio y 40.3% utilizando el método de reacción en cadena de la polimerasa. Los niveles de infección encontrados incrementan la importancia de T. maculata como vector involucrado en el ciclo de transmisión de T. cruzi. El análisis del polimorfismo de longitud de fragmentos de restricción de una región del gen Cyt B, permitió establecer en forma preliminar, diferencias en los patrones de bandas de este gen, según el origen geográfico de cada población. Esto puede asociarse a cambios relacionados con procesos adaptativos involucrados en la colonización de nuevos hábitats. No se observó variación genética para vectores capturados en diferentes ecotopos de una misma localidad. Sin embargo es evidente la participación del vector en el ciclo de transmisión, mostrando que la presencia de T. maculata en las casas no puede ser ignorada.

In order to understand more about the populational dynamics of Triatoma maculata, the genetic polimorphism and the infection indexes of Trypanosoma cruzi were analysed, using triatomine obtained from different ecotopes and geographical regions. The parasitic infection index of T. maculata was 29.8% using the microscope direct observation, and 40.3% by the polymerase chain reaction method. Both methods were important for epidemiological screening of the vectors with low potential of infection. The amplification of one region the Cyt B gene of these organisms, followed by a restriction fragments length polymorphism analysis, allowed us to establish different patterns of bands according to the geographic origin of each population, which indicates the lack of migration between individuals of Portuguesa and Anzoátegui states. These genetic differences may be associated with changes in adaptative events involved in the colonization of new habitats. The lack of polymorphism among vectors collected in different habitats of the same region showed an important genetic flow which has epidemiological implications in the risk of transmission of the disease, showing that the presence of T. maculata in houses cannot be ignored.